Реферат: Рекомендована к утверждению в качестве типовой

СоставителИ:

И.А.Новикова, заведующая кафедрой клинической лабораторной диагностики Учреждения образования «Гомельский государственный медицинский университет», доктор медицинских наук, профессор;

В.В.Воробьев, доцент кафедры анестезиологии и реаниматологии с курсом клинической биохимии Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет», кандидат биологических наук, доцент;

С.В. Лелевич, ассистент кафедры анестезиологии и реаниматологии с курсом клинической биохимии Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет», кандидат медицинских наук


Рецензенты:

Кафедра клинической лабораторной диагностики Государственного учреждения образования «Белорусская медицинская академия последипломного образования»;

Н.Л.Сергейчик, заведующая клинико-диагностической лабораторией Государственного учреждения «Республиканский научно-практический центр «Мать и дитя», главный внештатный специалист по клинической лабораторной диагностике Министерства здравоохранения Республики Беларусь, кандидат медицинских наук


^ Рекомендована к утверждению в качестве типовой:

Кафедрой клинической лабораторной диагностики Учреждения образования «Гомельский государственный медицинский университет» (протокол № 13 от 17.12.2009г.);

Кафедрой анестезиологии и реаниматологии с курсом клинической биохимии Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет» (протокол № 5 от 24.12.2009г.);

Центральным учебным научно-методическим советом Учреждения образования «Гомельский государственный медицинский университет» (протокол № 1 от 27.01.2010г.);

Центральным научно-методическим советом Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет» (протокол № 3 от 28.01.2010г.);

Секцией по специальности 1-79 01 04 Медико-диагностическое дело Учебно-методического объединения вузов Республики Беларусь по медицинскому образованию (протокол № 2 от 9.02.2010г.)


Пояснительная записка

Клиническая биохимия – дисциплина, которая занимается разработкой и использованием стандартных методов диагностики, контроля за течением заболеваний с позиций биохимии. Клиническая биохимия позволяет существенно облегчить научно-обоснованную постановку диагноза, выбор методов адекватного лечения и предупреждения заболеваний.

Клиническая биохимия является весьма важным разделом лабораторной диагностики. Она располагает наибольшим количеством специфических диагностических тестов, объемом информации и перспективами развития, что позволяет врачу разобраться в вопросах патогенеза и этиологии патологического процесса. Информация, полученная при использовании биохимических методов исследования, позволяет судить о динамике развития патологического процесса, что необходимо для своевременной диагностики заболевания, а также оценки эффективности проводимой терапии.

Данная область лабораторной диагностики бурно развивается. Только за последние десять лет клиническая биохимия получила в свое распоряжение более ста новых диагностических методов исследования, включая ДНК-диагностику, определение онкомаркеров, цитокинов, постановку тестов на апоптоз. Биохимическим исследованиям принадлежит приоритет в диагностике эндокринологических, гастроэнтерологических, кардиологических, нефрологических заболеваний, а также в токсикологической практике. Клиническая биохимия во многом опирается на теоретическую базу и тесно связана с такими науками как общая и биоорганическая химия, биологическая химия, гистология, нормальная и патологическая физиология, патологическая анатомия.

В программе по дисциплине «Клиническая биохимия» отражены актуальные тенденции развития клинической лабораторной диагностики и представлены современные клинические биохимические тесты в оценке индивидуальных белков сыворотки крови, липидного профиля, водно-электролитного и минерального обменов, кислотно-основного равновесия, гемостаза, ДНК-анализа.

Программа по дисциплине «Клиническая биохимия» предусматривает чтение лекций и проведение практических занятий. Основную нагрузку по выполнению программы несут практические занятия. Предполагается последовательное освоение всех этапов биохимического анализа, таких как, лабораторная аналитика, планирование исследования, подготовка пациента, взятие и подготовка биоматериала, выполнение аналитической процедуры, интерпретация результатов и оформление соответствующего заключения. Содержание практических занятий включает знакомство с работой биохимических лабораторий Учреждений здравоохранения, самостоятельную работу студентов в учебной биохимической лаборатории, а также решение обучающих клинических задач.

Типовая программа по дисциплине «Клиническая биохимия» разработана в соответствии с:

образовательным стандартом по специальности 11 – 79 01 04 «Медико-диагностическое дело» (регистрационный № ОС РБ 1-79 01 04-2007), утвержденным Постановлением Министерства образования Республики Беларусь от 02.05.2008г., №40;
типовым учебным планом по специальности 1 – 79 01 04 «Медико-диагностическое дело», утвержденным Министерством образования Республики Беларусь 12.02.2008г. (регистрационный номер № L 79 - 001/тип). ^ Цель и задачи учебной дисциплины
Цель: сформировать у студентов достаточный уровень клинико-биохимической компетентности необходимый для самостоятельного выполнения аналитических исследований и решения клинико- диагностических задач в биохимических отделах клинико-диагностических лабораторий.

Задачи:

освоить основные методы, применяемые для биохимических исследований в клинико-диагностических лабораториях;

сформировать представления о патохимических процессах, лежащих в основе изменения биохимических параметров при патологических состояниях;

выработать навыки использования биохимических методов исследований для характеристики функционирования различных органов и систем организма;

обучить современным биохимическим диагностическим технологиям;

сформировать знания о системе контроля качества биохимических лабораторных исследований.

^ Требования к освоению учебной дисциплины

Требования к усвоению учебной дисциплины «Клиническая биохимия» определены образовательным стандартом по специальности 1 – 79 01 04 «Медико-диагностическое дело».

В результате освоения дисциплины студент должен знать:

принципы и правила клинико-биохимической лабораторной аналитики;

лабораторное оборудование, реагенты, принципы автоматизации;

принципы и методики выполнения методов определения концентрации отдельных субстратов и активности ферментов в биологическом материале;

закономерности развития патобиохимических процессов при заболеваниях человека;

особенности изменения химического состава биологических жидкостей при заболеваниях;

уметь:

выбрать оптимальный аналитический метод исследования;

выполнять методики определения концентрации или активности отдельных аналитов в биологическом материале согласно номенклатуре методов рекомендуемых Министерством здравоохранения Республики Беларусь.

^ Структура содержания дисциплины «Клиническая биохимия»

1. Введение в дисциплину «Клиническая биохимия».

2. Аналитические технологии и оборудование современной клинико-диагностической лаборатории.


3. Методы биохимических исследований.

4. Методы исследования белков и азотсодержащих веществ.

5. Лабораторные методы исследования активности ферментов.

6. Методы определения углеводных и липидных компонентов.

7. Лабораторная оценка водно-минерального обмена и кислотно-основного состояния.

8. Лабораторные методы оценки системы гемостаза.

9. Методы исследования обмена гормонов и биогенных аминов.

10. Биохимические исследования в диагностике наследственных заболеваний и злокачественных опухолей.

^ Методы обучения

Основными методами обучения, адекватно отвечающими целям изучения данной дисциплины, являются:

лекции;

практические занятия;

учебно-исследовательская работа студентов;

научно-исследовательская работа студентов;

дистанционные методы (компакт-диски лекций, интернет);

^ Организация самостоятельной работы студентов

Самостоятельная работа включает:

выполнение клинических биохимических исследований;

оценку результатов выполненных лабораторных исследований,

самостоятельное составление планов клинико-биохимических обследований пациентов;

изучение и решение ситуационных клинических задач;

подготовку рефератов, сообщений, докладов по наиболее важным разделам дисциплины;

выполнение обучающих тестовых заданий;

участие в научно-исследовательской работе, студенческой Олимпиаде по дисциплине;

выступление с докладами на студенческих научных конференциях

На изучение дисциплины «Клиническая биохимия» определено 384 часа. Из них 240 аудиторных часов, в том числе лекций – 16 часов, практических – 224 часов.

Форма текущей аттестации: зачет – 6 семестр, экзамен – 7 семестр.

^ ПРИМЕРНЫЙ ТЕМАТИЧЕСКИЙ ПЛАН


Наименование раздела (темы)

Количество

аудиторных часов

лекций

практических

1

2

3

1. Введение в дисциплину «Клиническая биохимия»

2

14

1.1. Биохимические исследования в клинической практике

2

-

1.2. Организационные основы клинической биохимической диагностики

-

4

1.3. Устройство, оснащение и организация работы клинико-биохимической лаборатории

-

6

1.4. Охрана труда и техника безопасности в кдинической биохимической лаборатории

-

4

^ 2. Аналитические технологии и оборудование современной клинико-диагностической лаборатории

2

16

2.1. Лабораторная посуда и инструментарий. Средства пробоподготовки в лаборатории

-

4

2.2. Лабораторные реагенты

-

4

2.3. Отбор и подготовка биологических образцов для биохимических анализов

-

4

2.4. Аналитические основы биохимических исследований, единицы СИ

2

4

^ 3. Методы биохимических исследований

4

38

3.1. Методы абсорбционной фотометрии в клинической лаборатории

2

6

3.2. Методы эмиссионной фотометрии и рефрактометрии в клинической лаборатории

-

4

3.3. Иммунохимические методы анализа в клинической лаборатории

-

6

3.4.Методы радиоиммунологического и иммуноферментного анализа.

-

4

3.5. Методы фракционирования: электрофорез, хроматография

-

4

3.6. Молекулярно-биологические методы исследования

2

6

3.7. Автоматизация клинико-биохимических исследований

-

2

1

2

3

3.8. Методы «сухой химии» в клинико-диагностической лаборатории

-

6

^ 4. Методы исследования белков и азотсодержащих веществ

2

36

4.1. Методы определения белка сыворотки крови и мочи

2

4

4.2. Методы определения белковых фракций сыворотки крови

-

6

4.3. Методы анализа специфических белков сыворотки

-

6

4.4. Белки острой фазы. Пробы коллоидоустойчивости

-

4

4.5 Лабораторные методы определения остаточного азота и мочевины

-

4

4.6. Методы определения мочевой кислоты, креатинина и других азотсодержащих субстратов

-

6

4.7. Лабораторные методы оценки пигментного обмена

-

6

^ 5. Лабораторные методы исследования активности ферментов

-

18

5.1. Аналитические основы энзимологических исследований

-

6

5.2. Методы определения активности аминотрансфераз, альфа-амилазы, липазы, гаммаглутамилтранспептидазы, эластазы

-

6

5.3. Методы определения креатинкиназы, фосфатаз, лактатдегидрогеназы, альдолазы, глутаматдегидрогеназы. Определение ферментов в моче

-

6

^ 6. Методы определения углеводных и липидных компонентов

2

26

6.1. Лабораторные методы определения глюкозы

-

6

6.2. Лабораторные методы определения гликозилированных белков и углеводных компонентов крови

-

6

6.3.Лабораторные методы исследования состояния липидного обмена

2

6

6.4. Методы оценки липопротеинового состава крови

-

4

6.5. Система «перекисное окисление липидов – антиоксидантная защита организма»:







1

2

3

лабораторные методы оценки. Лабораторная оценка эндотоксемии

-

4

^ 7. Лабораторная оценка водно-минерального обмена и кислотно-основного состояния

2

24

7.1. Лабораторные методы оценки водно-электролитного баланса

-

6

7.2. Лабораторные методы оценки минерального обмена

-

6

7.3. Лабораторные методы оценки кислотно-основного состояния организма

-

6

7.4. Лабораторные методы оценки обмена железа

2

6

^ 8. Лабораторные методы оценки системы гемостаза

2

20

8.1.Представления о системе гемостаза. Преаналитический этап в оценке гемостаза

2

4

8.2. Методы исследования сосудисто-тромбоцитарного гемостаза

-

4

8.3. Методы исследования коагуляционного гемостаза

-

6

8.4.Методы исследования фибринолитической и противосвертывающей систем. Клинические аспекты оценки системы гемостаза

-

6

^ 9. Методы исследования обмена гормонов и биогенных аминов

-

26

9.1. Общее представление о методах исследования гормонального обмена

-

6

9.2.Лабораторная оценка обмена гормонов надпочечников

-

6

9.3.Лабораторная оценка обмена гормонов щитовидной железы

-

4

9.4.Лабораторная оценка обмена женских и мужских половых гормонов

-

6

9.5.Лабораторные методы исследования биогенных аминов

-

4

^ 10. Биохимические исследования в диагностике наследственных заболеваний и злокачественных опухолей

-

6

Всего часов

16

224


^ СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОГО МАТЕРИАЛА

1. Введение в дисциплину «Клиническая биохимия».

1.1. Биохимические исследования в клинической практике

Цели и задачи клинической биохимической диагностики. История развития клинической биохимической диагностики. Вклад российских и белорусских ученых в развитие. Связь с другими клиническими и теоретическими дисциплинами. Роль биохимической лаборатории в диагностическом процессе.

^ 1.2.Организационные основы клинической биохимической диагностики

Диагностические профили и диагностические алгоритмы. Принципы унификации и стандартизации клинических биохимических исследований.

Правила оформления направлений на клинические биохимические исследования. Характеристика плановых, неотложных и дежурных исследований. Основные этапы клинического биохимического исследования. Факторы преаналитического этапа, влияющие на результат лабораторного исследования. Правила транспортировки и хранения материала для биохимического исследования. Порядок приема и регистрации проб для планового и неотложного лабораторного исследования. Порядок выдачи результатов клинических биохимических исследований. Виды биологического материала используемого в клинических биохимических исследованиях.

^ 1.3. Устройство, оснащение и организация работы клинико-биохимической лаборатории

Биохимическая клинико-диагностическая лаборатория учреждений здравоохранения, организационная структура. Требования к помещениям клинической биохимической лаборатории, размеры площадей, перечень помещений, общее и локальное освещение, электроснабжение, система вентиляции. Виды лабораторного оборудования, аппаратов, приборов клинических биохимических лабораторий. Лабораторная мебель. Штаты клинической биохимической лаборатории. Централизация клинических биохимических лабораторных исследований.

^ 1.4. Охрана труда и техника безопасности в клинической биохимической лаборатории

Санитарно-противоэпидемический режим в клинической биохимической лаборатории. Содержание аптечки для неотложной медицинской помощи. Правила санитарно-противоэпидемического режима при взятии крови. Правила обеззараживания использованного материала.

Неотложная помощь пострадавшим в лаборатории при травмах, ожогах, поражении электротоком. Правила безопасной работы с едкими веществами (кислоты, щелочи) и токсическими реагентами. Средства индивидуальной защиты. Противопожарная безопасность в клинической биохимической лаборатории.

Способы и средства дезинфекции различных объектов биохимической лаборатории. Контроль качества стерилизации, методы. Упаковка материалов для стерилизации. Сроки хранения простерилизованных изделий. Профилактика внутрибольничного заражения ВИЧ-инфекцией в учреждениях здравоохранения. Меры предосторожности при оказании медицинской помощи, обслуживании больных и работе с биоматериалом.

^ 2. Аналитические технологии и оборудование современной клинико-диагностической лаборатории

2.1.Лабораторная посуда и инструментарий. Средства пробоподготовки в лаборатории

Лабораторная посуда, классификация. Стеклянная посуда общего и специального назначения. Мерная посуда. Проверка калиброванной посуды. Пластиковая посуда и расходные материалы. Правила ухода за лабораторной посудой. Мытье и сушка лабораторной посуды. Механические и физические методы очистки. Методы сушки. Виды и особенности работы со стеклянными приборами.

Металлическое и пластиковое оборудование. Лабораторный инструментарий. Пробки и обращение с ними. Фильтровальная и индикаторная бумага.

Дозирующие устройства. Требования к дозаторам жидкости. Автоматические дозаторы. Основные режимы дозирования: прямое, обратное, многократное, разведения.

Центрифугирование, принцип метода, основные определения и формулы. Основные типы центрифугирования (осаждение, препаративное, аналитическое), их характеристика. Конструкции роторов. Классификация центрифуг. Препаративное центрифугирование, методы. Области применения центрифуг.

Перемешивающие устройства, классификация, принципы работы. Термостатирующие устройства, классификация, принципы работы. Основные типы, их характеристики. Электронагревательные устройства. Меры безопасности. Весоизмерительная техника, классификация. Основные типы весов (аптечные, техно-химические, аналитические, торсионные). Полуавтоматические весы. Автоматические весы для экспресс-взвешивания. Правила эксплуатации весов.

^ 2.2. Лабораторные реагенты

Химические реактивы, определение, классификация. Правила работы с реактивами. Общие правила приготовления реактивов. Правила хранения химических реактивов. Особенности организации учета движения и размещения реактивов в лаборатории. Правила оформления этикеток на реактивах. Правила приготовления растворов. Правила разбавления процентных растворов. Правила приготовления титрованных растворов. Приготовление растворов из фиксаналов. Определение рН. Буферные растворы. Фильтрование, определение, виды фильтрующих материалов. Особенности фильтрования через бумажные фильтры. Правила фильтрования и сбора фильтрата в различные емкости, фильтрование под вакуумом. Питательные среды, классификация, состав. Применение для лабораторных исследований.

Плотность раствора, определение. Виды приборов для определения плотности, особенности измерения. Измерение температуры, виды термометров, особенности работы с ними. Характеристика термометров, используемых для измерения максимальных и минимальных температур, принципы действия манометрических и электрических термометров.

^ 2.3. Отбор и подготовка биологических образцов для биохимических анализов

Виды биологического материала, запрос на анализ, взятие материала, требования к доставке в лабораторию и хранению. Факторы влияющие на результаты биохимических исследований. Биологическая и аналитическая вариация.

^ 2.4. Аналитические основы биохимических исследований, единицы СИ

Основные критерии оценки аналитической надежности методов лабораторных исследований: воспроизводимость, правильность, специфичность, чувствительность. Принципы определения допустимых погрешностей результатов лабораторных исследований. Факторы и вариации, влияющие на результаты лабораторных исследований: биологические, ятрогенные, преаналитические, аналитические, постаналитические. Методы коррекции факторов вариации лабораторных исследований. Понятие «норма». Критерии выбора аналитического метода исследования в лаборатории. Характеристика степени патогномоничности изменения величины лабораторного показателя для той или иной патологии. Диагностическая специфичность и чувствительность теста, способы расчета. Полезность, диагностическая и клиническая значимость результатов лабораторных исследований. Критические величины результатов лабораторных исследований. Характеристика порога клинического решения.

Единицы СИ в клинической биохимической лаборатории, определение, основы, правила образования основных типов единиц. Правила применения системы единиц, коэффициенты перевода.

^ 3. Методы биохимических исследований

3.1. Методы абсорбционной фотометрии в клинической лаборатории

Фотометрические методы анализа. Методы адсорбционной фотометрии. Приборы, классификация и основные типы фотометрической аппаратуры, правила эксплуатации. Спектрофотометрия, фотоколориметрия, нефелометрия. Правила проведения фотометрии, способы оценки результатов фотометрии (по конечной точке, по фиксированному времени, кинетически), расчет результатов исследований (по калибровочной кривой, градуировочной кривой, стандартным растворам, в условных единицах, путем градуировки шкалы прибора).

^ 3.2. Методы эмиссионной фотометрии и рефрактометрии в клинической лаборатории

Эмиссионная фотометрия (флюориметрия, пламенная фотометрия), принципы методов. Приборы, классификация и основные типы, правила эксплуатации. Применение методов эмиссионной фотометрии в клинико-диагностической лаборатории (КДЛ).

Атомно-эмиссионный спектральный анализ. Принципы, способ оценки результатов, применение в КДЛ.

Рефрактометрия, поляриметрия: принципы анализа, приборы, возможности применения в КДЛ.

^ 3.3. Иммунохимические методы анализа в клинической лаборатории

Иммунохимические методы исследования: определение, аналитические характеристики, принципы проведения, подходы к измерению результатов реакции. Иммуноанализы с использованием меченых антигенов или антител, используемые метки. Гомогенный и гетерогенный иммунохимический анализ.

^ 3.4. Методы радиоиммунологического и иммуноферментного анализа

Радиоиммунологический анализ (РИА): виды, особенности методов, этапы исследования, преимущества и недостатки. Расчет результатов. Реагенты и наборы для РИА. Приборы для РИА, основные типы, преимущества, недостатки, техника безопасности.

Иммунолюминесцентные методы: принципы, классификация, приборы, применение в КДЛ. Иммуноферментный анализ (ИФА). Приборы для ИФА. Измерительное и вспомогательное оборудование для проведения ИФА. Классификация методов ИФА. Принцип проведения, преимущества, недостатки, аналитические характеристики, применение в лабораториях. Основные этапы ИФА. Возможные ошибки при проведении ИФА. Оценка результатов ИФА.

^ 3.5. Методы фракционирования: электрофорез, хроматография

Хроматография: принцип метода, основные понятия хроматографии, применяемые сорбенты, виды хроматографии и их принципы. Типы хроматографических методов в зависимости от агрегатного состояния подвижной и неподвижной фаз. Приборы для хроматографического анализа. Газовая хроматография, жидкостная хроматография, аффинная хроматография, ионообменная хроматография, гель-фильтрация: основные принципы, правила подготовки материала для исследований, применение.

Электрофорез: принцип метода, используемые носители, применение в клинике. Методы анализа электрофореграмм. Классификация методов электрофореза. Горизонтальный и вертикальный электрофорез, иммунный электрофорез, капиллярный электрофорез. Учет и представление результатов.

^ 3.6. Молекулярно-биологические методы исследования

Методы, основанные на полимеразной цепной реакции (ПЦР): оборудование, организация технологического процесса, правила санитарно-противоэпидемического режима. Подготовка образцов биоматериалов для тестирования нуклеиновых кислот.

Полимеразная цепная реакция: принцип, аналитическая процедура, ошибки. ДНК-зонды. ПЦР-анализ в реальном времени. Методы детекции продуктов амплификации. Интерпретация результатов.

Применение молекулярно-биологических методов в клинической практике.

^ 3.7. Автоматизация клинико-биохимических исследований

Принципы функционирования и основные типы технологических устройств для автоматизированного биохимического исследования. Биохимические полуавтоматические и автоматические анализаторы. Критерии оценки автоанализаторов, преимущества и недостатки. Особенности организации работы на автоанализаторах. Контроль качества биохимических исследований в рамках автоматизированной системы.

^ 3.8. Методы «сухой химии» в клинико-диагностической лаборатории

Методы «сухой химии», принцип и варианты метода. Аналитические характеристики. Индикаторные тест-полоски для полуколичественного и количественного анализа. Методы контроля функциональности тест-полосок. Приборы для «сухой» химии, основные типы, правила эксплуатации. Диагностические возможности и ограничения применения методов «сухой» химии в клинико-диагностических лабораториях.

^ 4. Методы исследования белков и азотсодержащих веществ

4.1. Методы определения белка сыворотки крови и мочи

Способы определения общего белка в сыворотке крови и других биологических жидкостях. Колориметрические методы (биуретовый метод, метод Лоури) и спектрофотометрический метод. Общие принципы, аналитическая процедура, чувствительность, причины ошибок.

Количественное турбидиметрическое определение белка в моче с сульфосалициловой кислотой, принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки.

Колориметрические экспресс-методы определения белка в моче. Колориметрический метод с реактивом Брэдфорда, принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки.

Определение белка Бенс-Джонса в моче. Показания к исследованию, правила подготовки материала, принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки.

Альбуминурия. Методы определения альбумина в моче. Клиническое значение определения альбумина в моче.

^ 4.2. Методы определения белковых фракций сыворотки крови

Определение содержания альбумина сыворотки (плазмы) крови (по реакции с бромкрезоловым зеленым, биуретовым методом), принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Преальбумин сыворотки крови.

Исследование белкового спектра плазмы (сыворотки) крови, принципы методов, чувствительность, ошибки. Требования к приборам, реагентам. Распределение белков плазмы (сыворотки) при электрофорезе на хроматографической бумаге, ацетатцеллюлозной пленке, гелях. Особенности аналитической процедуры и учета результатов в зависимости от носителя, интерпретация, чувствительность, ошибки. Анализ результатов с помощью денситометров. Иммуноэлектрофоретические техники в типировании моноклональных гаммапатий, подходы к выбору методов (электрофорез, иммунодиффузия, иммунофиксация), принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки, клинико-диагностические аспекты. Клинико-диагностическое значение исследования протеинограмм сыворотки крови.


^ 4.3. Методы анализа специфических белков сыворотки

Методы анализа специфических белков сыворотки, применяемые в лабораторной практике: иммунодиффузия, латекс-анализ, иммунонефелометрия, иммунотурбидиметрия, электрохемилюминесценция. Международная стандартизация исследования специфических белков. Методы подготовки образца. Референтные величины. Факторы, влияющие на результат измерения специфических белков. Допустимая аналитическая ошибка.

Определение тропонинов Т и I в сыворотке (плазме) крови (методом ИФА), принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки.

Определение миоглобина в сыворотке (плазме) крови (методом ИФА, РИА), принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Иммуноглобулины крови, представители, характеристика, методы определения, интерпретация результатов. Клинико-диагностическое значение определения специфических белков сыворотки крови.

^ 4.4. Белки острой фазы. Пробы коллоидоустойчивости

Определение кислого альфа-1-гликопротеина, альфа-1-антитрипсина, гаптоглобина, церулоплазмина, альфа-2-макроглобулина в сыворотке крови. Определение С-реактивного белка в сыворотке (плазме) крови (турбидиметрически, латексным методом), принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Высокочувствительный С-реактивный белок, определение. Клиническая значимость определения С-реактивного белка. Пробы коллоидоустойчивости белков сыворотки крови, принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки.

^ 4.5.Лабораторные методы определения остаточного азота и мочевины

Правила подготовки пациента, условия и способы взятия крови, условия хранения, подготовка биологического материала для исследования. Подходы к проведению исследований, тактика применения, ограничения использования. Специфика применения методов определения остаточного азота. Клинико-диагностическое значение.

Мочевина и методы ее определения: диацетилмонооксимный, уреазный методы. Принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение.

^ 4.6. Методы определения мочевой кислоты, креатинина и других азотсодержащих субстратов

Определение содержания креатинина и креатина в сыворотке крови и моче. Метод Яффе-Поппера, принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение. Кинетическое исследование содержания креатинина. Клинико-диагностическое значение. Геморенальные пробы. Методика и техника выполнения пробы Реберга. Амилазо-креатининовый индекс.

Методы определения мочевой кислоты в сыворотке крови и моче. Ферментативный (уриказный) метод. Принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение.

Определение содержания в сыворотке крови и моче индикана, аммиака, оксида азота, принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение.

Гомоцистеин в сыворотке крови, метод определения, интерпретация результатов.

^ 4.7. Лабораторные методы оценки пигментного обмена

Гемохромогенные пигменты. Транспорт и метаболизм билирубина. Лабораторные методы определения билирубина и его продуктов в крови и моче. Особенности преаналитического этапа. Определение общего билирубина в сыворотке крови (по Йендрашику, прямой спектрофотометрический метод), конъюгированного и неконъюгированного билирубина. Клинико-диагностическое значение. Методы определения содержания билирубина и уробилиноидов в моче. Определение стеркобилиногена в кале. Интерпретация результатов. Клинико-диагностическое значение исследований пигментного обмена при желтухах различного генеза.

Функциональные билирубинемии. Синдромы Жильбера, Кларка, Криглера-Найяра, Ориеса-Люцея, Дубина-Джонсона, Ротора. Клинико-лабораторные особенности. Физиологическая желтуха новорожденных, причины формирования, подходы к лабораторному мониторингу.

Лабораторная диагностика нарушений порфиринового обмена. Принципы обнаружения продуктов порфиринового обмена в биологическом материале. Определение порфиринов порфобилиногена, дельта-аминолевуленовой кислоты в моче, аналитическая процедура, чувствительность, ограничения, интерпретация.

Первичные и вторичные порфирии. Клинические проявления. Особенности лабораторных показателей при различных нарушениях порфиринового обмена.

^ 5. Лабораторные методы исследования активности ферментов

5.1. Аналитические основы энзимологических исследований

Аналитические основы энзимологических исследований. Правила взятия и хранения биологического материала. Классификация ферментов. Классификация методов определения активности ферментов. Методы выражения энзиматической активности. Специфика применения энзимологических методов.

^ 5.2. Методы определения активности аминотрансфераз, альфа-амилазы, липазы, гаммаглутамилтранспептидазы, эластазы

Методы определения активности аспартатаминотрансферазы и аланинаминотраснферазы в сыворотке крови (по Райтману-Френкелю, кинетически), принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение.

Метод определения активности альфа-амилазы в сыворотке крови (по Каравею), принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Методы определения активности амилазы с использованием хромогенных субстратов и кинетически, принцип, особенности. Клинико-диагностическое значение.

Метод определения активности панкреатической липазы в сыворотке крови (кинетически), принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение.

Метод определения активности гамма-глутамилтранспептидазы в сыворотке крови (кинетически), принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Клинико-диагностическое значение.

Эластаза, принцип метода определения, аналитическая процедура, интерпретация результатов.

^ 5.3. Методы определения креатинкиназы, фосфатаз, лактатдегидрогеназы, альдолаз, глутаматдегидрогеназы. Определение ферментов в моче

Метод определения общей активности креатинкиназы в сыворотке кров^ Метаболизм кальция, неорганического фосфора, магния, в организме. Регуляция обмена кальция, фосфора, магния.
Показания к определению концентрации кальция, магния и фосфора, виды биологического материала. Условия взятия, хранения и транспортировки биологического материала. Особенности преаналитического этапа.

Лабораторные тесты для исследования обмена кальция. Методы определения концентрации кальция (ионизированного и лигандного) и магния в биологических жидкостях (ионометрия, атомная адсорбционная спектрофотометрия), принципы, аналитическая процедура, чувствительность, интерпретация, ошибки. Ультрафильтрация как метод разделения фракций кальция.

Лабораторные тесты для исследования обмена фосфора. Методы определения концентрации неорганического и общего фосфора крови, неорганического фосфора мочи (по восстановлению фосфорномолибденовой кислоты), принцип, аналитическая процедура, чувствительность, интерпретация, ошибки.

Лабораторные тесты для исследования обмена магния. Исследование уровня магния в сыворотке крови, эритроцитах, моче. Методические подходы, клинико-диагности