Реферат: «Окраска по граму»

Фамилия __________________________ Шифр _____________
Имя __________________________
Район __________________________ Класс __________________________
Шифр ___________________________ Рабочее место № _____________

Задания

практического тура регионального этапа XXVI Всероссийской
олимпиады школьников по биологии. 2009-10 уч. год. 10 класс

Микробиология

Исследование морфологии микроскопических организмов с помощью дифференциально-диагностического метода
«Окраска по ГРАМУ»

Оборудование и материалы: предметные стекла, микробиологическая петля, спиртовка, кристаллизатор с подставкой для препаратов, промывалка с водой, микроскоп, 1%-ный водный раствор генцианвиолета или кристаллвиолета, раствор Люголя, склянка с 95%-ным этанолом, 0,1%-ный водный раствор фуксина, чистые суточные культуры микроорганизмов, дезинфицирующий раствор, защитные маски, перчатки, чепцы, спички, иммерсионное масло.

Цель работы: Провести исследование чистых культур микроорганизмов. Определить с помощью дифференциально-диагностического метода «Окраска по ГРАМУ» родовую принадлежность микроорганизма.

^ Внимание! При выполнении задания соблюдайте технику безопасности, работу выполняйте в перчатках.

Ход работы:

1. На предметное стекло, при помощи бактериальной петли, нанести мазок. Высушить его на воздухе, а затем зафиксировать в пламени спиртовки. Мазок должен быть равномерно растертым и не густым. Фиксированный мазок – носит название ПРЕПАРАТ (5 баллов).

2. Приступить к окраске по Граму (5 баллов).

Этап 1: на препарат нанести несколько капель раствора генцианвиолета. Окрашивать 1 – 2 минуты. Слить остатки красителя.

Этап 2: не промывая водой, нанести раствор Люголя до почернения
(1 мин.), затем раствор слить.

Этап 3: не промывая водой, нанести 96% спирт до отхождения красителя (30-60 с).

Этап 4: промыть препарат водой.

Этап 5: докрасить фуксином 3 мин, промыть водой и высушить.

3. Микроскопировать окрашенный препарат при помощи иммерсионной системы светового микроскопа. По результатам окрашивания грамположительные микроорганизмы окрасятся в сине-фиолетовый цвет, а грамотрицательные в розово-малиновый. Внимание! Приготовленный и окрашенный препарат продемонстрируйте преподавателю! (5 баллов).

4. Зарисовать увиденные в поле зрения микроскопа объекты в отведенное для этого поле справа на бланке работы (3 балла).

5. Сравнить полученный рисунок с изображениями основных форм бактерий (см. приложение 1). Определить родовую принадлежность исследованного микроорганизма и предположить его видовое название (2 балла).


^ Родовое название м/о
(в скобках укажите номер соответствующего рисунка приложения 1)

Видовое название м/о
(выскажите предположение)

наименование Чистой культуры

(заполняется преподавателем
при проверке)


____________________ (____)


__________________________


__________________________

Проверил __________________ Сумма балов _________________


Приложение 1


Основные формы бактерий




1 – стафилококки; 2 – стрептококки; 3 – сарцины; 4 – гонококки;
5 – пневмококки; 6 – капсула пневмококков; 7 – коринебактерии дифтерии; 8 – клостридии; 9 – бациллы: 10 – эшерихии; 11 – спириллы;
12 – трепонемы; 13 – борреллии; 14 – лептоспиры; 15 – актиномицеты;
16 – расположение жгутиков: а) монотрих; б) лофотрих; в) амфитрих;
г) перитрих.