Лекция: Изопикническое центрифугирование

Метод изопикнического (равновесного) центрифугирования основан на разделении объектов по зонам вследствие их разных плотностей (рис. 10).

Рисунок 10. Изопикническое центрифугирование.

Плотности частиц должны быть в пределах градиента плотности. Градиент может создаваться заранее, как в методе зонально-скоростного центрифугирования или формироваться в процессе самого разделения вследствие баланса диффузионных и центробежных сил. В первом случае пробу наслаивают в виде зоны, во втором – она распределена по объему вместе с градиентообразующим веществом, в качестве которых используют соли тяжелых металлов, например хлориды рубидия или цезия, а также сахарозу. Образец, например, ДНК, смешивают с концентрированным раствором хлористого цезия. Метод применяется главным образом в аналитическом центрифугировании и был использован Мезельсоном и Сталем для изучения механизма репликации ДНК Е. coli.