Доклад: Работа № 3. Определение содержания гемоглобина в крови цианметгемоглобиновым методом по Драбкину.

Принцип метода.Гемоглобин окисляют в метгемоглобин (гемиглобин) железосинеродистым калием (красная кровяная соль), образующийся с ацетонциангидрином окрашенный цианметгемоглобин (гемиглобинцианид) определяют колометрически.

Ход работы. В пробирку (опыт) (осторожно!) отмерить 5 мл. трансформирующего раствора (реактив Драпкина), к нему добавить 0,02 мл крови (разведена в 251 раз). В другую пробирку (стандарт) прилить 5 мл реактива Драпкина и 0,02 мл стандартного раствора. Содержимое обеих пробирок перемешать и в течение 30 минут выдержать при комнатной температуре. Измерить экстинцию опытной и стандартной проб на ФЭКэ при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против холостой пробы (трансформирующий раствор).

Расчетсодержания гемоглобина произвести по формуле:

Hb(г/л)=Еоп/Ест ×С × К × 0,01, где

Еоп – экстинкция опытной пробы;

Ест – экстинкция стандартного раствора;

С – концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе (59,75 мг/100мл);

К – коэффициент разведения крови (251);

0,01 – коэффициент пересчета мг/100 мл в г/л.

Сопоставить с нормой содержания у здоровых людей и сделать вывод.

У здоровых людей концентрация гемоглобинаколеблется в следующих пределах:

-новорожденные – 210 – 225 г/л;

— дети в возрасте 1 месяца – 145 — 165 г/л;

— дети в возрасте 6 месяцев – 115 — 130 г/л;

— дети в возрасте 1 года – 110 — 120 г/л;

— дети в возрасте 14-15 лет – 130 -150г/л;

— взрослые женщины – 120 — 140 г/л, мужчины – 135 — 160г/л.

Клинико-диагностическое значение определения содержания гемоглобина в крови:снижение содержания гемоглобина в крови наблюдается при анемиях различного генеза, при острых и хронических кровотечениях, некоторых инфекционных заболеваниях; повышение – при сгущении крови, при заболеваниях, связанных с увеличением количества эритроцитов (эритремии) и др.